UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS CARRERA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA Tema: Evaluación de la actividad citotóxica y antioxidante de diferentes nanoemulsiones obtenidas a partir de extractos de Marco (Ambrosia arborescens). Trabajo de Titulación, modalidad Proyecto de Investigación previa a la obtención del Título de Ingeniera Bioquímica, otorgado por la Universidad Técnica de Ambato, a través de la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos. Autor: Viviana Elizabeth Ruiz Bonilla Tutor: MSc. Yunys Pérez Betancourt Ambato - Ecuador Julio - 2018 i APROBACIÓN DEL TUTOR MSc. Yunys Pérez Betancourt CERTIFICA: Que el presente trabajo de titulación ha sido prolijamente revisado. Por lo tanto, autorizo la presentación de este Trabajo de Titulación modalidad Proyecto de Investigación, el mismo que responde a las normas establecidas en el Reglamento de Títulos y Grados de la Facultad. Ambato, 19 de junio de 2018 MSc. Yunys Pérez Betancourt C.I. 1756472740 TUTOR ii AUTORÍA DEL TRABAJO DE TITULACIÓN Yo, Viviana Elizabeth Ruiz Bonilla, manifiesto que los resultados obtenidos en el presente Proyecto de Investigación, previo la obtención del Título de Ingeniera Bioquímica son absolutamente originales, auténticos y personales; a excepción de las citas. Srta. Viviana Elizabeth Ruiz Bonilla C.I. 1804346722 AUTORA iii APROBACIÓN DEL TRIBUNAL DE GRADO Los suscritos Profesores Calificadores, aprueban el presente Trabajo de Titulación modalidad Proyecto de Investigación, el mismo que ha sido elaborado de conformidad con las disposiciones emitidas por la Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos de la Universidad Técnica de Ambato. Para constancia firman: Presidente del Tribunal Lic. MSc. Danae Fernández Rivero C.I. 1757181209 MSc. Wilson Patricio Orozco Freire C.I. 1721363008 Ambato, 09 de julio del 2018 iv DERECHOS DE AUTOR Autorizo a la Universidad Técnica de Ambato, para que haga de este proyecto de investigación o parte de él, un documento disponible para su lectura, consulta y procesos de investigación, según las normas de la Institución. Cedo los Derechos en línea patrimoniales de mi Proyecto, con fines de difusión pública, además apruebo la reproducción de este Proyecto dentro de las regulaciones de la Universidad, siempre y cuando esta reproducción no suponga una ganancia económica y se realice respetando mis derechos de autor. Srta. Viviana Elizabeth Ruiz Bonilla C.I. 1804346722 AUTORA v DEDICATORIA A Dios. Por haberme dado fuerzas para superar todos los obstáculos y permitirme llegar a alcanzar mis objetivos, y por su infinita bondad y amor me ha permitido aprender muchas lecciones de vida. A mi madre y mis abuelitos. Aunque ya no se encuentran conmigo, siempre han sido el motor de mi vida porque con su amor tan grande y sus enseñanzas hicieron de mí la persona que soy ahora. A mi padre Carlos. Por todos sus consejos, su dedicación y apoyo incondicional, esto logro es dedicado con mucho cariño para él. A mi familia. Principalmente a Jenny y Magdalena por haber sido mis amigas, mi apoyo y mi guía en cada momento de mi vida. A mi hermano Fernando que con su apoyo y motivación me ha ayudado a salir adelante. vi AGRADECIMIENTO Quiero expresar mi más profundo agradecimiento a todas aquellas personas que hicieron posible la realización de este trabajo de investigación. Principalmente quiero agradecer a mi director de tesis MSc. Yunys Pérez, gracias por ser más que un tutor un amigo que me brindó su apoyo incondicional, gracias por sus enseñanzas, su dedicación y su tiempo. También quiero agradecer a los docentes Ph. D. Orestes López, Ph. D. Sandra Horvitz, MSc. Dolores Robalino, gracias por su orientación, su tiempo y ayuda desinteresada. A mis amigos de la universidad que han sido un gran apoyo moral y humano en todos los buenos y malos momentos que hemos compartido juntos. Finalmente quiero agradecer a la Universidad Técnica de Ambato y a mi querida facultad por abrirme sus puertas en todos estos años de vida universitaria. A todos, muchas gracias. vii ÍNDICE GENERAL DE CONTENIDOS A. PÁGINAS PRELIMINARES PORTADA .................................................................................................................... I APROBACIÓN DEL TUTOR .................................................................................... II AUTORÍA DEL TRABAJO DE TITULACIÓN ...................................................... III APROBACIÓN DEL TRIBUNAL DE GRADO ...................................................... IV DERECHOS DE AUTOR .......................................................................................... V DEDICATORIA ........................................................................................................ VI AGRADECIMIENTO .............................................................................................. VII ÍNDICE GENERAL DE CONTENIDOS ............................................................... VIII ÍNDICE DE TABLAS ............................................................................................... XI ÍNDICE DE FIGURAS ............................................................................................. XII ÍNDICE DE ANEXOS ............................................................................................ XIII RESUMEN .............................................................................................................. XIV ABSTRACT ............................................................................................................. XV B. TEXTO INTRODUCCIÓN ....................................................................................................... 1 CAPÍTULO I .............................................................................................................. 3 1.1. TEMA DE INVESTIGACIÓN ............................................................................... 3 1.2. JUSTIFICACIÓN ............................................................................................... 3 1.3. OBJETIVOS ...................................................................................................... 4 1.3.1. Objetivo General .................................................................................... 4 1.3.2. Objetivos Específicos ............................................................................. 4 CAPÍTULO II ............................................................................................................ 6 2.1. ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS ................................................................... 6 2.1.1. Etnomedicina.......................................................................................... 6 2.1.2. Marco (Ambrosia arborescens) ............................................................. 7 2.1.2.1. Taxonomía .......................................................................................... 7 2.1.2.2. Morfología y hábitat ........................................................................... 7 viii 2.1.2.3. Usos Tradicionales ............................................................................. 8 2.1.2.4. Composición Química ........................................................................ 8 2.1.3. Actividad antioxidante ........................................................................... 9 2.1.3.1. Prevención del cáncer ......................................................................... 9 2.1.3.2. Antioxidantes .................................................................................... 10 2.1.3.3. Radicales libres y estrés oxidativo ................................................... 11 2.1.3.4. Métodos para evaluar actividad antioxidante ................................... 13 2.1.4. Actividad citotóxica .............................................................................. 14 2.1.4.1. Cáncer ............................................................................................... 14 2.1.4.2. Citotoxicidad .................................................................................... 15 2.1.4.3. Método de MTT para cuantificar viabilidad celular......................... 16 2.1.5. Nanoemulsiones ................................................................................... 17 2.1.5.1. Nanobiotecnología ............................................................................ 17 2.1.5.2. Nanobiotecnología y el cáncer ......................................................... 18 2.1.5.3. Emulsiones ....................................................................................... 19 2.1.5.4. Surfactantes ...................................................................................... 21 2.1.5.5. Nanoemulsiones ............................................................................... 22 2.2. HIPÓTESIS ..................................................................................................... 23 2.3. SEÑALAMIENTO DE VARIABLES DE LA HIPÓTESIS .......................................... 24 2.3.1. Variables dependientes ........................................................................ 24 2.3.2. Variables independientes ..................................................................... 24 CAPÍTULO III ......................................................................................................... 25 3.1. MATERIALES ................................................................................................ 25 3.2. EQUIPOS ......................................................................................................