Scophthalmus Maeoticus) Eggs As an Indicator of Its Development

Journal of Siberian Federal University. Biology 2017 10(1): 9-19 ~ ~ ~

УДК 597.556.35:591.12 (262.5)

Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus) Eggs as an Indicator of its Development

Antonina N. Khanaychenko*, Leonid S. Svetlichny, Vitaly E. Giragosov and Elena S. Hubareva Kovalevsky Institute of Marine Biological Research RAS 2 Nakhimov, Sevastopol, 299011, Russia

Received 19.12.2016, received in revised form 23.01.2017, accepted 28.02.2017

Rate of oxygen consumption of the Black Sea turbot (Scophthalmus maeoticus) during early ontogenesis depending on stage of development, morphological norm and temperature (11 and 16 °C) was studied. -1 -1 Oxygen consumption at blastula stage was the lowest, varied between 0.0057 and 0.0061 mg O2 ind h and was independent among egg batches in studied temperature range. Aerobic metabolism increased -1 -1 22 times at 16 °C, reaching 0.1348±0.0205 mg O2 ind h , and only 13 times at 11 °C from blastula to active embryo stage. Temperature interval 5 °С gave a mean Q10 of 2.6 for the rate of oxygen consumption of the Black Sea turbot during embryogenesis. Aerobic metabolism appeared twice lower at gastrula stage in embryos with morphological defects revealed from tail bud stage onwards incompatible with the development to a viable larvae, than that in normally developing embryos.

Keywords: Black Sea turbot, Scophthalmus maeoticus, respiration of the eggs, development.

Citation: Khanaychenko A.N., Svetlichny L.S., Giragosov V.E., Hubareva E.S. Respiration of the Black Sea turbot (Scophthalmus maeoticus) eggs as an indicator of its development. J. Sib. Fed. Univ. Biol., 2017, 10(1), 9-19. DOI: 10.17516/1997- 1389-0004.

– 9 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

Дыхание икры черноморского калкана (Scophthalmus maeoticus) как показатель ее развития

А.Н. Ханайченко, Л.С. Светличный, В.Е. Гирагосов, Е.С. Губарева Институт морских биологических исследований имени А.О. Ковалевского РАН Россия, 299011, Севастополь, пр. Нахимова, 2

Исследовано дыхание черноморского калкана (Scophthalmus maeoticus) в течение раннего онтогенеза в зависимости от стадии, наличия морфологических аномалий развития и температуры (11 и 16 °С). Скорость потребления кислорода была наименьшей на стадии -1 -1 бластулы и незначимо варьировала от 0,0057 до 0,0061 мкг О2 экз ч между икрой разных серий и при разных температурах. При нормальном морфологическом развитии аэробный метаболизм возрастает от бластулы до стадии подвижного эмбриона в 22 раза, равняясь -1 -1 (0,1348±0,0205) мкг О2 экз ч при 16 °C и только в 13 раз при 11 °C. Температурный коэффициент Q10 составил в среднем 2,6 для аэробного метаболизма калкана в течение эмбриогенеза. Аэробный метаболизм на стадии гаструлы оказался вдвое ниже у икры, для которой на более поздних стадиях, начиная с образования хвостовой почки, обнаруживали аномалии развития, не совместимые с развитием до жизнеспособной личинки, по сравнению с нормально развивавшейся икрой.

Ключевые слова: черноморский калкан, Scophthalmus maeoticus, дыхание икры, развитие.

Введение воспроизводства и роста промыслового за- Черноморская камбала калкан паса калкана. Поэтому одновременно с раз- Scophthalmus maeoticus (Pallas) (Froese, Pauly, работкой научно обоснованных методов экс- 2016) является одним из ценных промыс- плуатации естественной популяции калкана ловых видов рыб Черного моря и перспек- необходимо способствовать становлению его тивным объектом марикультуры. Калкан искусственного воспроизводства. подвергался значительному перелову на про- Наличие высококачественных икры и тяжении десятилетий в результате тралового личинок – одно из важнейших условий для лова с 1950-х гг. В Севастопольском регионе с эффективного воспроизводства вида. Пло- 2009 по 2014 г. относительные уловы калкана довитость калкана очень высокая, самки по- снизились более чем десятикратно, а числен- тенциально могут выметать порционно за ность оплодотворенной икры калкана в их- нерестовый сезон 2-12 млн икринок. Но вы- тиопланктонных ловах упала практически до живаемость икры и личинок на ранних ста- нуля (Гирагосов и др., 2015). Принимаемые в диях развития как в море, так и в условиях настоящее время меры по регулированию аквакультуры невысока из-за их чувствитель- промысла не могут гарантировать быстрого ности к большому числу негативных вну- восстановления стабильного естественного тренних и внешних факторов. В море у бе- – 10 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

регов Севастополя калкан выметывает икру ловых продуктов от одной пары производите- на глубине от 30 до 100 м (преимущественно лей калкана, отловленных жаберными сетями на 50 м) при температуре придонного слоя в районе нереста. Производителей доставля- 6-10 °C с середины апреля до начала июня. ли в лабораторию и после предварительной Оплодотворенная пелагическая икра подни- оценки исходного качества икры и спермы мается к поверхности, где развивается в хоро- осуществляли искусственное оплодотворе- шо аэрируемом слое при температуре от 10 до ние икры при температуре (11±0,5) °C. Опло- 18 °C. Эмбрионы калкана не способны избе- дотворение и развитие икры оценивали по об- гать резких смен температуры, которые про- щепринятым методикам (Kjorsvik et al., 2004) исходят в период весенних штормов, поэтому на стадии 8 бластомеров в трех пробах по 100 температурный фактор играет важную роль икринок. Нормально развивающаяся икра во время раннего онтогенеза калкана и влияет имеет положительную плавучесть, прозрач- на выживаемость. Норма морфогенетических ная, с небольшим объемом перивителлино- характеристик на каждом этапе эмбриогенеза вого пространства, бластомеры при делении определяет жизнеспособность личинок после имеют правильную форму, икринки находят- выклева и их эффективный переход на внеш- ся на одной стадии. После оценки качества нее питание и, как следствие, обеспечивает икру промывали дезинфицированной мор- высокую выживаемость генерации (Kjоrsvik ской водой (18 ‰), сохраняли в термостатиро- et al., 2003). ванных сосудах при температуре (11±0,5) °C и Метаболизм черноморского калкана на в дальнейшем использовали в экспериментах стадиях от икры до малькового периода изу- для определения скорости потребления кис- чен отрывочно, без связи с морфологически- лорода. ми изменениями организма (Столбов и др., Измерение дыхания икры проводили при 1995; Минкина и др., 2006). Закономерности двух температурных режимах – 11 и 16 °C (во изменения потребления кислорода калканом второй экспериментальной серии нижний на разных этапах эмбрионального и раннего температурный режим постепенно повышали, постэмбрионального развития в зависимости начиная со стадии органогенеза таким обра- от нормальности развития и температурного зом, что лецитотрофные личинки находились фактора до настоящего времени практически в режиме 12 °C). Диапазон эксперименталь- не изучены. Данное исследование было на- ных температур соответствовал средним ко- правлено на определение закономерностей лебаниям температуры поверхности моря в изменения потребления кислорода калканом период массового развития икры калкана и на разных этапах эмбрионального и ранне- физиологическим лимитам температур для личиночного развития в диапазоне темпера- раннего развития калкана (Битюкова и др., тур жизнедеятельности для оценки уровня 1984). В процессе экспериментальных иссле- обмена нормально и аномально развиваю- дований дыхания калкана ежедневно прово- щихся организмов. дили визуальные наблюдения за развитием эмбрионов и лецитотрофных личинок, опре- Материалы и методы деляя последовательность этапов и наличие В экспериментах было использовано три или отсутствие аномалий развития по морфо- партии оплодотворенной икры, каждая из ко- логическим критериям. Развитие эмбрионов торых была получена путем сцеживания по- оценивали на стадиях дробления, бластулы, – 11 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

гаструлы, органогенеза, роста хвостового от- ленную по трем порциям воды (~0,2 мл), вво- дела и стадии подвижного эмбриона, личи- димым шприцами в измерительную камеру нок – на выклеве и перед началом активного переменного объема, расположенную непо- питания (Дехник, 1973). Для этого аликвоты средственно над мембраной люминесцентно- икры и личинок предварительно просматри- го датчика кислорода Hach LDO (Svetlichny et вали под бинокуляром МБС-2 при увеличе- al., 2012). Измерения потребления кислорода нии 8×4, а затем производили прижизненную проводили на последовательных стадиях раз- цифровую съемку объектов с помощью ин- вития калкана от стадии бластулы до выклева вертированного светового микроскопа Nikon и у лецитотрофных личинок непосредствен- Eclipse (при увеличении ×4; ×10; ×20), осна- но после выклева и перед переходом на экзо- щенного аналоговой видеокамерой, подклю- генное питание. Средние значения скорости ченной к компьютеру. Прозрачность икры потребления кислорода калканом были по- калкана позволяла с помощью микроскопа лучены как минимум по пяти измерениям легко оценить характер деления бластомеров дыхания калкана на разных стадиях развития на стадии дробления и морфологию эмбриона (30-60 икринок или 2-6 личинок на респиро- на дальнейших этапах развития. метр). Влияние температуры на потребление -1 -1 Скорость дыхания (R, мкг O2 экз ч ) кислорода оценивали по Q10, рассчитанным определяли методом закрытых респироме- по уравнению Вант Гоффа: тров, в качестве которых были использованы шприцы объемом 1-2 мл. В экспериментах ис- >10 lgV lgV @ 2 1 пользовали фильтрованную и стерилизован- LgQ10 , t2 t1 ную ультрафиолетом морскую воду (ФУМВ)

(18 ‰). Предварительно промытые ФУМВ где V1 – скорость потребления кислорода при

икринки, у которых отсутствовали видимые температуре t1, а V2 – скорость потребления

морфологические признаки патологии, осто- кислорода при температуре t2. рожно переносили микропипеткой в наполнен- Статистическую обработку данных про- ные ФУМВ опытные шприцы (в 3-5 повторно- водили, используя стандартный пакет Excel, стях) и помещали в термостаты с постоянной оценку достоверности различий средних осу- температурой 11 или 16 °C. Исследования ды- ществляли по критерию Стьюдента (n = 5; хания икры проводили в условиях нормоксии; p < 0,05). исходная концентрация кислорода при 16 °C -1 Результаты варьировала в пределах 7-8,5 мкг О2 мл , при -1 11 °C – в пределах 7,5-9 мкг О2 мл . Экспо- Диаметр оплодотворенной икры калкана зиция составляла 3-4 ч. В течение инкубации составлял (1,28±0,03) мм, а диаметр жировой шприцы периодически вращали для переме- капли – (0,22±0,01) мм, морфологическая нор- шивания икринок, устранения возможных за- ма которых приведена на рис. 1 (1.1-1.7). стоев воды и уравновешивания концентрации В первой экспериментальной серии при кислорода. Количество потребленного икрой температуре 11 °C были получены сравни- кислорода определяли по разнице его концен- тельные характеристики дыхания двух раз- трации в контрольных и опытных шприцах в ных партий икры от двух разных пар произ- конце экспозиции. Концентрацию кислорода водителей (рис. 2). Оценка, проведенная на в шприцах вычисляли как среднюю, опреде- стадии 8 бластомеров согласно общеприня- – 12 – Рис. 1. Развитие калкана в раннем онтогенезе: норма развития 1 – дробление (8 бластомеров); 2 – бластула; 3 – гаструла; 4 – формирование хвостовой почки; 5 – подвижный эмбрион; 6 – личинка на выклеве; 7 – личинка перед началом экзогенного питания; 8 – икра на стадии сегментации; 9 – норма формирования хвостовой почки; 10, 11 – аномалии формирования хвостовой почки; 12 – аномалия хвостового отдела подвижного эмбриона калкана; Kv – Купферов пузырек; Tb – хвостовая почка

Рис. 2. Потребление кислорода (мкг О2 экз-1ч-1±SD) эмбрионами калкана от разных скрещиваний на ранних этапах развития при 11 ºС Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

тым методикам (Kjorsvik et al., 2004), показа- температурного режима, однако уровень ме- ла, что икра развивалась нормально, т.е. про- таболизма эмбрионов значимо увеличивался исходило синхронное деление бластомеров с повышением температуры (рис. 3). В начале без признаков аномалий дробления (рис. 1.1); эмбриогенеза (от ранней до поздней бластулы) икра была прозрачной и имела положитель- потребление кислорода икрой калкана было ную плавучесть. Энергетический обмен икры низким и практически не зависело от темпе- из обеих групп закономерно возрастал в про- ратурного режима, различия были незначи- -1 -1 цессе эмбриогенеза от стадии бластулы к мыми (p > 0,05): (0,0059±0,0025) мкг О2 экз ч -1 -1 стадии органогенеза. На стадии бластулы при 11 °С и (0,0061±0,0016) мкг О2 экз ч при (рис. 1.2) не было отмечено значимых разли- 16 °C (рис. 3). Потребление кислорода эм- чий в потреблении кислорода икрой из обеих брионами калкана повышалось к середине партий: (0,0057±0,0018) и (0,0057±0,0005) мкг эмбриогенеза, но значимо быстрее при более -1 -1 O2 экз ч . Однако скорость дыхания на ста- высокой температуре, чем при низкой: на ста- дии гаструлы (рис. 1.3) (p < 0,005) и на стадии дии гаструлы (р < 0,05) – (0,0161±0,0028) мкг -1 -1 сегментации (p < 0,005) оказалась достоверно О2 экз ч при 16 °C и (0,0081±0,0005) мкг -1 -1 вдвое ниже у эмбрионов, в развитии которых О2 экз ч при 11 °C. В связи с тем что раз- морфологические аномалии определялись на витие калкана на стадии органогенеза значи- более поздних стадиях, от начала появления тельно затормаживалось при 11 °C в первом Купферова пузырька (рис. 1.8), при формиро- эксперименте и приводило к низкому процен- вании хвостовой почки (рис. 1.10-1.11) и роста ту выклева даже из нормально развивающей- хвостового отдела (рис. 1.12), по сравнению с ся икры, во втором эксперименте у икры, на- эмбрионами, у которых не было обнаружено ходящейся в низкотемпературном режиме, на патологии формирования хвостовой почки стадии органогенеза температуру повышали (рис. 1.9) и в дальнейшем хвостового отдела. на 0,5 °C. На этой стадии кислородный об- Выклев из партии икры с более низким кис- мен икры также значимо (t = 0,0008; р < 0,05) -1 -1 лородным обменом был более длительным и был выше – (0,0426±0,0008) мкг О2 экз ч при составил не более 2 % личинок, из которых 16 °C, чем при 11,5 °C, (0,0278±0,0045) мкг -1 -1 более 90 % обнаруживали аномалии развития О2 экз ч . Скорость потребления кислорода хвостовой части. Выклев личинок из партии икрой оказалась максимальна на стадии под- с более высоким кислородным обменом при вижного эмбриона, в течение которой проис- 11 °C был тоже растянут во времени и не пре- ходило постоянное активное движение заро- вышал 10 %, но доля разнообразных анома- дыша, подготавливающегося к выклеву, и она лий развития составила менее 30 %. также значимо (t = 0,01; р < 0,05) различалась -1 -1 Во второй экспериментальной серии оце- при 16 °C (0,135±0,0205 мкг О2 экз ч ) и 11,5 °C -1 -1 нивали кислородный обмен эмбрионов одной (0,0801±0,0115 мкг О2 экз ч ). К моменту вы- партии икры (полученной от одной пары клева температуру повышали дополнительно производителей) при двух температурных на 0,5 °C; таким образом, на стадии лецито- режимах (11 и 16 °C). Скорость метаболиз- трофных личинок температура в нижнем диа- ма калкана закономерно возрастала по мере пазоне составляла 12 °C. развития зародыша, достигая максимальной Лецитотрофные личинки (рис. 1.6) прак- величины на стадии подвижного эмбриона тически неподвижны, имеют положительную (рис. 1.5) перед выклевом вне зависимости от плавучесть за счет желточного мешка и жиро- – 14 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

Рис. 3. Потребление кислорода (мкг О2 экз-1ч-1±SD) эмбрионами калкана на ранних этапах развития в зависимости от температуры (ºС). Бласт. – бластула, Гастр. – гаструла, Сегм. – сегментация, ПЭ – подвижный эмбрион, Выклев – личинки после выклева, ЭП – личинки на эндогенном питании перед переходом на экзогенное питание

вой капли под поверхностной пленкой воды, ному эмбриону при 16 °C, в то время как при и их обмен в одном и том же температурном 11 °C скорость потребления кислорода за тот режиме не отличался значимо от подвижных же период онтогенеза увеличивается только в эмбрионов (рис. 1.5) перед выклевом (рис. 3). 13 раз. Однако различия дыхания калкана при 12 и Коэффициент Q10, рассчитанный по на- 16 °C оказались значимыми на протяжении шим данным в изученном диапазоне темпе- всей стадии лецитотрофных личинок (р < ратур, оказался самым низким (1,1) на стадии 0,05). Перед началом экзогенного питания бластулы, наиболее высоким (3,9) на стадии личинок (рис. 1.7) скорость кислородного гаструлы, 2,6 – на стадии сегментации и 3,2 – обмена имела тенденцию к незначительному на стадии подвижного эмбриона, составив в -1 -1 возрастанию до (0,0953±0,0174) мкг О2 экз ч среднем 2,7 для эмбрионального периода. -1 -1 при 12 °C и (0,1434±0,0233) мкг О2 экз ч при 16 °C. Обсуждение Таким образом, скорость потребления По нашим неопубликованным данным, кислорода как нормально развивающейся до оплодотворенная икра калкана поднимает- выклева икры, так и икры, нормально разви- ся от 50-70 до 0 м за 2-2,5 ч и претерпевает вавшейся на ранних этапах, но проявляющей перепад температуры от 6-10 °C (в придон- на поздних этапах развития отклонения от ном слое воды) до 10-18 °C (в поверхностном нормы, не совместимые с жизнеспособно- слое воды). Следовательно, икра калкана на стью личинок, незначимо различается на ста- стадии бластулы должна быть эволюционно дии бластулы как в нижнем, так и в верхнем адаптирована как к низким температурам, экстремуме диапазона температур жизнедея- так и к широкому диапазону температурных тельности калкана в раннем онтогенезе. Зако- изменений. Изученные нами партии икры номерное возрастание уровня метаболизма в были получены путем искусственного опло- 22 раза наблюдается при развитии нормаль- дотворения при 11 °C. Возможно, поэтому ных эмбрионов от стадии бластулы к подвиж- на стадии бластулы было получено самое – 15 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

низкое значение Q10. Наибольшей термоза- ного периода и начинает расходоваться толь- висимостью характеризуется поздняя стадия ко после выклева личинки. Единственным гаструлы перед началом органогенеза, что, источником незаменимых питательных ве- по-видимому, свидетельствует о том, что ществ, обеспечивающих все метаболические именно на этом этапе начинают происходить процессы в течение эмбрионального периода, важные морфогенетические движения в за- является желток. Фосфолипиды, необходи- родыше и скорость этих процессов опреде- мые для формирования мембран делящихся ляет норму развития. клеток, тканей и органов зародыша, содер- Полученные данные свидетельствуют о жатся только в желтке (Silversand et al., 1996) и том, что правильное дробление икры (на ста- составляют 40-45 % от общих липидов заро- дии 8 бластомеров) не всегда является досто- дыша (Planas et al., 1993). Для нормальной экс- верным признаком ее успешного дальнейше- прессии генов в процессе развития эмбриона го развития и заниженный энергетический важно определенное содержание и соотноше- метаболизм, начиная со стадии гаструляции, ние в липидах желтка незаменимых ненасы- свидетельствует о нарушении гомеостаза щенных жирных кислот (Cunha et al., 2015). икры, который в дальнейшем проявляется в Рост и энергетика развития зародыша зависят нарушениях развития и приводит к гибели от эффективного переноса липидных моле- зародыша. После оплодотворения развиваю- кул между тканями и клеточными компонен- щаяся пелагическая икра использует только тами, особенно в период органогенеза, когда те вещества, которые были получены ооци- они необходимы для построения достаточно- том в процессе оогенеза в яичниках самки. го количества дополнительных мембранных Для обеспечения нормального развития структур быстро делящихся клеток и произ- икра должна содержать запас всех веществ, водства энергии для процессов метаболизма и необходимых для поддержания гомеостаза движения зародыша (Cunha et al., 2015). и эмбрионального развития, и метаболиче- Вероятнее всего, незначительное «пере- ские процессы в ней должны происходить с зревание» икры служит причиной понижен- определенной скоростью. Любые нарушения ного метаболизма (рис. 2) при аномалиях в эмбриогенезе, приводящие к гибели эмбри- развития икры, проявляющихся на поздних она или личинки на стадии эндогенного пи- этапах (рис. 1.11, 1.12). Задержка икры по- тания, являются результатом нарушения го- сле овуляции в полости яичника приводит к меостаза икры. После стадии дробления они, кислородному голоданию икры, которое мо- по-видимому, либо являются результатом жет вызвать серьезные метаболические из- нарушений трофики ооцитов, либо связаны менения (Kjоrsvik et al., 2004). В частности, с нарушениями экспрессии генов зародыша нежелательные окислительные процессы в (Cunha et al., 2015). липидных компонентах, не используемых на В икре рыб рода Scophthalmus запасные этапах дробления и гаструляции, но исполь- вещества присутствуют в двух формах и в зуемых для формирования тканей и органов двух структурах, в желтке и жировой капле. зародыша на этапах органогенеза (Silversand Но жировая капля, на долю которой приходит- et al., 1996). ся 55-60 % от общих липидов, содержащихся Даже при нормальных желтковых запа- в икре (Silversand et al., 1996), находится в не- сах отклонения от оптимальной для органоге- изменной форме в течение всего эмбриональ- неза температуры, которая в случае камбалы – 16 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

калкан, по-видимому, приходится на темпе- для атлантического тюрбо (Finn, Ronestad, ратуры ≤ 11 °C, может привести к нарушению 2003). Незначительные различия в потребле- метаболизма в период от начала сегментации нии кислорода и Q10 могут быть отнесены до формирования хвостовой почки, в течение за счет различий метаболизма организмов образования и присутствия у эмбриона вре- с несколько отличающимися размерными и менной структуры Купферова пузырька. При плотностными характеристиками (средний 11 °C выявлена достоверная связь между низ- диаметр икры тюрбо – 1,03 мм – меньше диа- ким кислородным обменом на этапе сегмен- метра икры калкана, соленосный оптимум тации, задержкой в развитии, нарушениями развития эмбрионов тюрбо – 34,5 ‰). Увели- (рис. 1.10, 1.11) структуры Купферова пузырь- чение скорости метаболизма в процессе эм- ка (рис. 1.8), проявляющихся на более позд- брионального развития зародышей калкана, них этапах развития аномалиями хвостового как и у атлантического тюрбо, по-видимому, отдела (рис. 1.12) и, как следствие, низкой вы- связано с возрастанием энергетических трат живаемости личинок. Данные по аэробному по мере возрастания интенсивности процес- обмену икры на поздних этапах развития со- сов экспрессии генов, пролиферации и ми- ответствуют полученной ранее закономерно- грации клеток. сти снижения толерантности к пониженным температурам на поздних этапах эмбриогене- Заключение за калкана (Битюкова и др., 1984). Правильное дробление на стадии 8 бла- При нормальном эмбриональном раз- стомеров не всегда достоверный признак витии калкана при 16 °C характерно более успешного дальнейшего развития икры кал- чем 20-кратное повышение уровня обмена кана. Заниженный уровень обмена на ранних и, соответственно, потребности в кислоро- этапах развития может вести к аномалиям, де, от (0,0061±0,0016) на стадии бластулы проявляющимся на поздних этапах эмбриоге- -1 -1 до (0,1348±0,0205) мкг О2 экз ч на стадии неза. При температуре ≤ 11 °C низкий уровень подвижного эмбриона и лецитотрофных метаболизма приводит к задержке развития личинок. Наши данные согласуются с обоб- во второй половине эмбриогенеза и, как ре- щенными усредненными значениями интен- зультат, к аномалиям развития, несовмести- сивности дыхания икры калкана, установ- мым с жизнедеятельностью лецитотрофной ленными ранее полярографическим методом личинки. Нормальное развитие эмбриона при (Минкина и др., 2006). Однако данные по 16 °C может быть обеспечено возрастающим скорости потребления кислорода личинка- потреблением кислорода: от 0,006 на стадии -1 -1 ми калкана на 1-2-е сутки после выклева, бластулы до (0,143±0,023) мкг О2 экз ч на полученные в аппарате Варбурга – 2,39 мкг стадии подвижного эмбриона. Таким образом, -1 -1 О2 экз ч (Столбов и др., 1995), по нашему полученные данные позволяют предположить мнению, являются чрезвычайно завышенны- неэффективность раннего нереста калкана ми. Найденные нами закономерности измене- в природных условиях до прогрева поверх- ния потребления кислорода нормально раз- ностных вод как минимум до 12 °C. Наибо- вивающейся икрой калкана в зависимости от лее эффективный нерест калкана приходится температурного режима от стадии бластулы на период, когда температура поверхностных до окончания стадии эндогенного питания вод достигает 15-16 °C. Наши данные могут аналогичны закономерностям, полученным иметь практическое значение в аквакультуре – 17 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

как для разработки экспресс-метода оценки метаболизма, так и для усовершенствования качества партий икры калкана по уровню ее технологии ее инкубации.

Список литературы Битюкова Ю.Е., Ткаченко Н.К., Чепурнов А.В. (1984) Термочувствительность калкана Psetta maeotica (Pallas) (Scophthalmidae) в период эмбрионального развития при искусственном выращивании. Вопросы ихтиологии, 24 (3): 459-463 [Bityukova Y.E., Tkachenko N.K., Chepurnov A.V. (1984) Thermosensitivity of the Black Sea turbot Psetta maeotica (Pallas) (Scophthalmidae) during the period of embryonic development. Journal of Ichthyology [Voprosi Ikhtiologii], 24 (3): 459-463 (in Russian)] Гирагосов В.Е., Ханайченко А.Н., Рауэн Т.В., Аганесова Л.О., Баяндина Ю.С., Смир- нов Д.Ю. (2015) Оценка состояния природной популяции и культивирование черноморской камбалы-калкана в ИнБЮМ (ИМБИ): достижения, ограничения и перспективы. Актуальные проблемы аквакультуры в современный период: материалы международной научной конфе- ренции. Ростов-на-Дону, c. 43-46 [Giragosov V.E., Khanaychenko A.N., Rauen T.V., Aganesova L.O., Baiandina Y.S., Smirnov D.Y. (2015) Assessment of the natural population and cultivation of the Black Sea turbot in IBSS (IMBR): achievements, constraints and perspectives. Current issues in aquaculture: Proceedings of the International Scientific Conference. Rostov-on-Don, p. 43-46 (in Russian)] Дехник Т.В. (1973) Ихтиопланктон Черного моря. Киев, Наукова думка, 235 с. [Dekhnik T.V. (1973) Ichthyoplankton of the Black Sea. Kyiv, Naukova Dumka, 235 p. (in Russian)] Минкина Н.И., Павлова Е.В., Самышев Э.З., Гордина А.Д. (2006) Энергетический обмен икры, личинок и мальков черноморской камбалы калкан и его изменения в условиях загряз- нения. Системы контроля окружающей среды. Севастополь, НАН Украины. МГИ, с. 347-356 [Minkina N.I., Pavlova E.V., Samyshev E.Z., Gordina A.D. (2006) Energetic metabolism of eggs, larvae and juveniles of the Black Sea turbot and its changes in polluted environment. Systems of environmental control. Sevastopol, NAS Ukraine. MHI, p. 347-356 (in Russian)] Столбов А.Я., Ставицкая Е.Н., Битюкова Ю.Е., Ткаченко Н.К. (1995) Интенсивность по- требления кислорода и экскреция азота у черноморской камбалы калкана Psetta maeotica (Pallas) на разных стадиях личиночного развития. Депонировано в ВИНИТИ, 6 c. [Stolbov A.Ya., Stavitskaya E.N., BityukovaY.E., Tkachenko N.K. (1995) Intensity of oxygen consumption and nitrogen excretion in the Black Sea turbot Psetta maeotica (Pallas) on different stages of development. Deposited in VINITI, 6 p. (in Russian)] Cunha I., GalanteOliveira S., Rocha E., Urbatzka R., Castro L.F.C. (2015) Expression of intercellular lipid transport and cholesterol metabolism genes in eggs and early larvae stages of turbot, Scophthalmus maximus, a marine aquaculture species. Marine Biology, 162 (8): 1673-1683 Finn R.N., Ronnestad I. (2003) The effect of acute changes in temperature and light on the aerobic metabolism of embryos and yolk-sac larvae of turbot (Scophthalmus maximus). Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences, 60: 1324-1331 Froese R., Pauly D. Editors. (2016) FishBase. http://www.fishbase.org/photos/ThumbnailsSummary. php?Genus=Scophthalmus&Species=maeoticus# (accessed on 01/2016) Kjorsvik E., Hoehne-Reitan K., Reitan, K.I. (2003) Egg and larval quality criteria as predictive measures for juvenile production in turbot (Scophthalmus maximus L.). Aquaculture, 227 (1): 9-20 – 18 – Antonina N. Khanaychenko, Leonid S. Svetlichny… Respiration of the Black Sea Turbot (Scophthalmus maeoticus)…

Kjorsvik E., Pittman K., Pavlov D. (2004) From fertilisation to the end of metamorphosis functional development. Culture of cold-water marine fish. Moksness E., Kjorsvik E., Olsen Y. (eds.) Oxford, Blackwell Publishing, p. 204-225 Planas M., Labarta U., Fernandez-Reiriz M.J., Ferreiro M.J., Munilla R., Garrido J.L. (1993) Chemical changes during development in turbot (Scophthalmus maximus) eggs and larvae. Physiological and biochemical aspects of fish development. Walther B.T., Fyhn H.J. (eds.) Bergen, Norway, University of Bergen, p. 269-278 Silversand C., Norberg B., Haux C. (1996) Fatty-acid composition of ovulated eggs from wild and cultured turbot (Scophthalmus maximus) in relation to yolk and oil globule lipids. Marine Biology, 125: 269-278 Svetlichny L., Hubareva E., Khanaychenko A. (2012) Calanipeda aquaedulcis and Arctodiaptomus salinus are exceptionally euryhaline osmoconformers: evidence from mortality, oxygen consumption, and mass density patterns. Marine Ecology Progress Series, 470: 15-29